微生物的培养基??
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发布时间：2022-04-23 12:53
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时间：2023-10-14 07:24
1.1培养基的设计原则
1）目标明确（微生物类型、种子、发酵、分离、保藏）
明确培养基的用途，如用于培养何种微生物，培养的目的如何，是培养菌种还是用于发酵生产，发酵生产的目的是获得大量菌体还是获得次级代谢产物等，根据不同的菌种及其不同的培养目的确定搭配的营养成分及营养比例。
营养的要求主要是对碳素和氮素的性质，如果是自养型的微生物则主要考虑无机碳源，如果是异样型的微生物，主要提供有机碳源物质；除碳源物质外，还要考虑加入适量的无机矿物质元素；有些微生物菌种在培养时还要求加入一定的生长因子，如很多乳酸菌在培养时，要求在培养基中加入一些氨基酸和维生素等才能很好地生长。
2）营养协调
--6大营养要素的适合比例
--尤其C/N比 (分离:细菌约4/1;酵母约6/1;霉菌约8/1)
除营养物质要求外，还要考虑营养成分的比例适当，其中碳素营养与氮素营养的比例很重要。C/N 比是指培养基中所含 C 原子的摩尔浓度与 N 原子的摩尔浓度之比，不同的微生物菌种要求不同的 C/N 比，同一菌种，在不同的生长时期也有不同的要求，一般 C/N 比在配制发酵生产用培养基时，要求比较严格， C/N 比例对发酵产物的积累影响很大；一般在发酵工业上，发酵用种子的培养，培养基的营养越丰富越好，尤其是 N 源要丰富，而对以积累次级代谢产物为发酵目的的发酵培养基，则要求提高 C/N 比值，提高 C 素营养物质的含量。
3）合适的理化条件
除营养成分外，培养基的理化条件也直接影响微生物的生长和正常代谢.
◆ pH（内源调节、外源调节）
微生物一般都有它们适宜的生长pH 范围，细菌的最适pH 一般在pH 7～8范围，放线菌要求pH 7.5～8.5范围，酵母菌要求pH 3.8～6.0, 霉菌的适宜pH 为4.0～5.8。
由于微生物在代谢过程中，不断地向培养基中分泌代谢产物，影响培养基的pH变化，对大多数微生物来说，主要产生酸性产物，所以在培养过程中常引起pH的下降，影响微生物的生长繁殖速度。为了尽可能地减缓在培养过程中pH的变化，在配制培养基时，要加入一定的缓冲物质，通过培养基中的这些成分发挥调节作用，常用的缓冲物质主要有以下两类：
3）合适的理化条件
除营养成分外，培养基的理化条件也直接影响微生物的生长和正常代谢.
----pH（内源调节、外源调节）
----渗透压
----水活度（相对湿度）
----氧化还原电位(V, mV)
好氧菌：>0.3 V; 厌氧菌<0.1V
4）成本
1.2培养基的设计方法
1）生态模拟
2）参照文献进行适当修改
3）试验比较
----单因子比较选择出主要C、N源、
无机 盐等
----正交试验确定适宜的浓度
2 培养基的种类
根据培养基的成分：天然培养基 组合培养基 半组合培养基
根据培养基的功能分：加富性选择培养基 抑制性选择培养基
（根据某些微生物的营养要求或对某些化学物质敏感性不同设计而成、有利于所分离微生物的生长或抑制它种微生物，从而达到选择分离目的的培养基。）
（1）加富性选择培养基
----纤维素培养基：富集纤维素分解菌
----阿什贝培养基:富集好氧性自生固氮菌
----Martin培养基：富集土壤真菌
（2）抑制性选择培养基
在培养基中加入抑制性物质
细菌：庆大霉素、青霉素、链霉素、四环素
G+：胆盐
真菌：制霉菌素、放线菌酮
2 鉴别性培养基
一类在培养基中加入能与目的菌无色代谢物发生显色反应的指示剂，从而达到用肉眼辨别颜色就能方便地鉴别某种微生物的培养基。
---- 伊红美蓝乳糖培养基（EMB）
1）伊红、美蓝两种苯胺染料对G+和部分G-抑制作用
2) 伊红、美蓝在低酸度下结合并形成沉淀起产酸指示作用
3）大肠杆菌发酵乳糖产酸
菌落区别于不利用乳糖的其它肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽。
4）大肠杆菌产酸强
菌落区别于利用乳糖产酸弱的其它肠道菌，产酸力弱的肠道菌的菌落呈棕色。
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时间：2023-10-14 07:25
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1.1培养基的设计原则
1）目标明确（微生物类型、种子、发酵、分离、保藏）
明确培养基的用途，如用于培养何种微生物，培养的目的如何，是培养菌种还是用于发酵生产，发酵生产的目的是获得大量菌体还是获得次级代谢产物等，根据不同的菌种及其不同的培养目的确定搭配的营养成分及营养比例。
营养的要求主要是对碳素和氮素的性质，如果是自养型的微生物则主要考虑无机碳源，如果是异样型的微生物，主要提供有机碳源物质；除碳源物质外，还要考虑加入适量的无机矿物质元素；有些微生物菌种在培养时还要求加入一定的生长因子，如很多乳酸菌在培养时，要求在培养基中加入一些氨基酸和维生素等才能很好地生长。
2）营养协调
--6大营养要素的适合比例
--尤其C/N比 (分离:细菌约4/1;酵母约6/1;霉菌约8/1)
除营养物质要求外，还要考虑营养成分的比例适当，其中碳素营养与氮素营养的比例很重要。C/N 比是指培养基中所含 C 原子的摩尔浓度与 N 原子的摩尔浓度之比，不同的微生物菌种要求不同的 C/N 比，同一菌种，在不同的生长时期也有不同的要求，一般 C/N 比在配制发酵生产用培养基时，要求比较严格， C/N 比例对发酵产物的积累影响很大；一般在发酵工业上，发酵用种子的培养，培养基的营养越丰富越好，尤其是 N 源要丰富，而对以积累次级代谢产物为发酵目的的发酵培养基，则要求提高 C/N 比值，提高 C 素营养物质的含量。
3）合适的理化条件
除营养成分外，培养基的理化条件也直接影响微生物的生长和正常代谢.
◆ pH（内源调节、外源调节）
微生物一般都有它们适宜的生长pH 范围，细菌的最适pH 一般在pH 7～8范围，放线菌要求pH 7.5～8.5范围，酵母菌要求pH 3.8～6.0, 霉菌的适宜pH 为4.0～5.8。
由于微生物在代谢过程中，不断地向培养基中分泌代谢产物，影响培养基的pH变化，对大多数微生物来说，主要产生酸性产物，所以在培养过程中常引起pH的下降，影响微生物的生长繁殖速度。为了尽可能地减缓在培养过程中pH的变化，在配制培养基时，要加入一定的缓冲物质，通过培养基中的这些成分发挥调节作用，常用的缓冲物质主要有以下两类：
3）合适的理化条件
除营养成分外，培养基的理化条件也直接影响微生物的生长和正常代谢.
----pH（内源调节、外源调节）
----渗透压
----水活度（相对湿度）
----氧化还原电位(V, mV)
好氧菌：>0.3 V; 厌氧菌<0.1V
4）成本
1.2培养基的设计方法
1）生态模拟
2）参照文献进行适当修改
3）试验比较
----单因子比较选择出主要C、N源、
无机 盐等
----正交试验确定适宜的浓度
2 培养基的种类
根据培养基的成分：天然培养基 组合培养基 半组合培养基
根据培养基的功能分：加富性选择培养基 抑制性选择培养基
（根据某些微生物的营养要求或对某些化学物质敏感性不同设计而成、有利于所分离微生物的生长或抑制它种微生物，从而达到选择分离目的的培养基。）
（1）加富性选择培养基
----纤维素培养基：富集纤维素分解菌
----阿什贝培养基:富集好氧性自生固氮菌
----Martin培养基：富集土壤真菌
（2）抑制性选择培养基
在培养基中加入抑制性物质
细菌：庆大霉素、青霉素、链霉素、四环素
G+：胆盐
真菌：制霉菌素、放线菌酮
2 鉴别性培养基
一类在培养基中加入能与目的菌无色代谢物发生显色反应的指示剂，从而达到用肉眼辨别颜色就能方便地鉴别某种微生物的培养基。
---- 伊红美蓝乳糖培养基（EMB）
1）伊红、美蓝两种苯胺染料对G+和部分G-抑制作用
2) 伊红、美蓝在低酸度下结合并形成沉淀起产酸指示作用
3）大肠杆菌发酵乳糖产酸
菌落区别于不利用乳糖的其它肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽。
4）大肠杆菌产酸强
菌落区别于利用乳糖产酸弱的其它肠道菌，产酸力弱的肠道菌的菌落呈棕色。
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