发布网友 发布时间:2023-01-24 08:56
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热心网友 时间:2023-09-12 21:02
coip实验原理如下:
CoIP(Co-Immunoprecipitation)即免疫共沉淀,以抗体和抗原之间的专一性互作为基础,用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效技术。
属于免疫沉淀技术的一类,常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分。免疫共沉淀的设计理念是,假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员。
那么利用这种蛋白的特异性抗体及能与抗体结合的proteinA/G珠就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下来(即pull-down),达到富集该蛋白复合物的目的。
进而通过质谱的方式鉴定这个蛋白复合物中的其他未知成员或通过WB验证已知蛋白是否与预测蛋白结合。免疫共沉淀的特点可以概括为两点,第一是天然状态,第二是蛋白复合物。
抗体选择:用于COIP实验的抗体必须是IP级别的抗体,所以选购抗体时一定要看清楚该抗体能否用于IP实验。如下图为ABCAM中某个抗体的应用范围及使用量说明,选购时需注意。