免疫组化的面积
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发布时间：2023-01-23 03:38
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时间：2024-12-01 11:39
免疫组化染色是用一抗与被检测组织中目的蛋白抗原结合，然后用HRP等标记的二抗与一抗进行结合，最后通过与DAB显色剂反应，进而确认所要检测蛋白抗原的定位、半定量等目的。
免疫组化更多的意义在于查看目的蛋白的定位。定量一般用western来实现。
免疫组化染色和HE染色的不同之处可能是HE染色比较粗略地辨认不同细胞形态学改变；而后者能够针对特异性细胞标志物来检测特异性细胞的改变（数量）、也可检测细胞内细胞因子的转位，组织中一些特异性蛋白的表达的量改变（通过图像分析系统分析颜色深浅、分布的面积等综合分析）。
通俗的讲，HE仅仅是看大体病理改变，比如组织坏死，比如炎性渗出。免疫组化，看你的目的蛋白的表达情况。
免疫组化和****HE****染色的对比
DAB和HE一样也是一种染色剂，HE染色相对简单，能分辨出细胞中的嗜酸嗜碱性物质；DAB染色全称应该叫做免疫组化DAB染色，经过一系列复杂的生化反应后，DAB(二氨基联苯胺)染色剂能将辣根过氧化物酶染成棕色。
常用的免疫组化染色方法:
组化用HRP的话，信号不够强。通常用生物素标记HRP来增强信号。
1、 ABC法（卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法）
ABC法是利用卵白素与生物素特有的高度亲和力特性，与生物素化二抗结合，形成抗原＋特异性抗体＋生物素化二抗＋卵白素＋生物素＋HRP复合物，最后DAB显色。
复合物配制：先将生物素与酶结合，形成生物素化HRP，以生物素化HRP与卵白素按一定比例混合，形成卵白素-生物素-过氧化物酶复合物。
2、 SP法（抗生物素蛋白链酶素-过氧化物酶复合物）
本身没有连接生物素，但有两个生物素亲和力极高的结合位点，可以与二抗上的生物素结合，敏感性高，复合物不需要使用前混合，更为简便。
3、 PAP法
4、 直接法
样本制备
免疫组化结果分析
免疫组化结果的判断原则：
1 、必须设阳性对照和阴性对照。
2 、 抗原表达必须在特定部位。
3 、 阴性结果不能视为抗原不表达。
免疫组化染色实验组与对照组结果分析表
从表可以看出只有6、7实验结果有意义。1-5均因对照组的结果已否定Ab的特异性或IHC技术操作存在错误等而使实验结果失去意义，必须重复实验或换用Ab。
染色失败的几种情况及原因:
1、 所染的全部切片均为阴性结果，包括阳性对照在内。
2、 所有切片均呈阳性反应。
3、 所有切片背景过深。
4、 阳性对照染色良好，检测的阳性标本呈阴性反应。
所有切片呈阳性反应，其原因:
1、 切片在染色过程中抗体过浓，或干片了。
2、 缓冲液配置中未加氯化纳和PH值不准确， 洗涤不彻底。
3、 使用已变色的呈色底物溶液，或呈色反 应时间过长。
4、 抗体温育的时间过长。
5、 H 2 O 2 浓度过高，呈色速度过快且粘附剂太厚。
热心网友
时间：2024-12-01 11:39
免疫组化，就是对癌组织进行基因检测，手术切除的癌组织，都会做普通病理检查，把癌组织做成标本，通过显微镜下观察癌细胞的形态，来确定癌症的类型，如：腺癌，鳞癌，淋巴癌，基底细胞癌等等。免疫组化就是对癌细胞里面的基因进行检测，正常人体内有500多种癌基因，癌基因正常有促进细胞增殖的作用。但是有的癌基因，功能过度旺盛，细胞无序增殖，就会形成癌组织，每一种癌症对应的癌基因不一样
热心网友
时间：2024-12-01 11:40
