微生物接种方法有哪几种?
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发布时间：2022-04-23 20:37
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时间：2022-06-22 14:16
一、平板划线分离法
平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
二、斜面接种法
该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。
三、穿刺接种法
穿刺培养，是指将带有欲培养微生物的接种针深插至半固体培养基（琼脂含量0.2%〜1.0%）中接种，并进行微生物固体深层培养的一种方法，主要用于厌氧或兼性厌氧微生物的培养。
四、液体接种法
液体培养，是指将微生物直接接种于液体培养基中，并不断振荡或搅拌，使微生物均匀地在液体培养基中生长繁殖的一种培养方法。液体培养适用于好氧微生物和植物组织培养，以迅速得到大量繁殖体为目的。
五、涂布接种法
微生物学实验中的一种操作方法。由于将含菌材料现加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平台法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。
扩展资料：
接种注意事项
1、每次接种时间最长不得连续超过2小时。
2、操作时，接种工具尖端和种块不能接触到管口和外部其它物体。工具尖端碰到外面物体要重换工具，种块碰到外面物体则作废。
3、一般用种量：每支试管母种可扩繁一级种100支左右；扩接原种6～8瓶。
参考资料：搜狗百科-接种
参考资料：搜狗百科-平板划线分离法
参考资料：搜狗百科-涂布平板法
参考资料：搜狗百科-穿刺培养
参考资料：搜狗百科-斜面法
参考资料：搜狗百科-液体接种
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时间：2022-06-22 15:34
是将细菌分离培养的常用技术，其目的是将混有多种细菌的培养物，或标本中不同的细菌（病原菌与非病原菌）使其分散生长，形成单个菌落或分离出单一菌株，便于识别鉴定。平板划线接种方法较多，其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。
（1）分段划线法
平板分段划线(左)及培养后菌落分布图
本法多用于含菌量较多的标本。方法是以接种环沾取少许样品先涂布于平板培养基表面一角作为第一段划线（划线时接种环与培养基表面呈45度角），然后将接种环置火焰上灭菌，俟冷（可接触平板试之，如不融化琼脂，即已冷却），于第二段处再作划线，且在开始划线时与第一段的划线相交接数次，以后划线不必再相接，待第二段划完时，再如上法灭菌，接种划线，依次划至最后一段，灭菌接种环。这样每一段划线内的细菌数逐渐减少，即以获得单个菌落，划线接种完毕，盖好平皿盖，倒置（平板底部向上）于37℃温箱中培养。
（2）连续划线法：此法多用于接种材料中含菌数量不太多的样品或培养物。方法是先将样品或培养物涂于平板表面的一角，然后用接种环自样品涂擦处开始，向左右两侧划开并逐渐向下移动，连续划成若干条分散的平等线。
2、斜面接种法
此法主要用于移种纯菌，使其增殖后用于鉴定或保存菌种。通常是从平板培养物上挑取某一单独菌落或者从一支已长好的斜面菌种，移种至斜面培养基上，接种步骤如下（以从已长好的斜面菌种转接为例）：
（1）左手拿两支试管，一支为经灭菌的斜面，另一支为已长好的菌种。右手持接种环或接种针通过火焰灭菌后俟冷，并同时以右手小指和无名指轻轻拔取两支试管的棉塞或试管帽（先转动棉塞后拔去），夹持于手指间。
（2）将试管口通过火焰数次，并稍转动，以防止外界的污染。
（3）首先将接种环伸入有菌试管，使接种环接触菌苔取少量菌，取出接种环，立即将管口通过火焰灭菌后将接种环伸入斜面管内，先从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上的蜿蜒涂布，或直接烧试管口，塞好棉塞或盖好试管帽，将接种环插到酒精瓶中。
3、倾注培养法
本法用于饲料中细菌、霉菌的计数。方法是取原始样品或经适当稀释的（通常是10-1~10-5
稀释）液体1mL，置于直径9cm无菌平皿内，倾入已融化并冷至50℃左右的培养基约13~15mL
，立即混匀，待凝固后倒置，于一定温度下培养一定小时，作菌落计数。
4、 穿刺接种法
此法多用于双糖、半固体、明胶等培养基的接种，方法与斜面接种类似。用接种针挑取菌落或菌液少许，由培养基表面*直刺至管底（若为三糖铁并在斜面加以涂布），然后沿穿刺线拔出接种针（注：接种半固体看动力者不穿刺到底）。
5、液体接种法
此法多用于单糖发酵试验等，接种方法与斜面接种方法基本相同。以左手持培养基与菌种管，右手持接种环和拔持棉塞，将挑取的菌落或菌液接种于液体培养基内。
扩展资料：
接种注意事项
1、每次接种时间最长不得连续超过2小时。
2、操作时，接种工具尖端和种块不能接触到管口和外部其它物体。工具尖端碰到外面物体要重换工具，种块碰到外面物体则作废。
3、一般用种量：每支试管母种可扩繁一级种100支左右；扩接原种6～8瓶。
参考资料：搜狗百科-接种
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时间：2022-06-22 17:08
这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。
2、三点接种
在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。
3、穿刺接种
在保藏厌氧菌种或研究微物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。
4、浇混接种
该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°c左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。
5、涂布接种
与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。
6、液体接种
从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。
7、注射接种
该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。
8、活体接种
活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。
扩展资料:
微生物接种需要注意的事项:
一、所有人员进入实验室必须穿工作服，进入无菌室需更换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验人员不得进入实验室。
二、禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有害、有毒、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品等应按规定处理。
三、超净工作台使用注意事项：
1、使用超净工作台前应先用75%的酒精擦拭双手，然后打开风机和日光灯；
2、操作过程中使用的所有器皿必须事先灭好菌；
3、接种环和接种针在接种前必须经火焰灼烧至全部金属丝发红，接头处也必须严格灼烧；
4、用完超净工作台，把带来的东西全部带走，用
75%酒精擦拭整个工作台，关闭日光灯和风机，打开紫外灯进行消毒。
参考资料:搜狗百科——接种
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时间：2022-06-22 19:00
这种方式是将细菌分离培养的常用技术，其目的是将混有多种细菌的培养物，或标本中不同的细菌（病原菌与非病原菌）使其分散生长，形成单个菌落或分离出单一菌株，便于识别鉴定。平板划线接种方法较多，其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。
二、斜面接种法
此法主要用于移种纯菌，使其增殖后用于鉴定或保存菌种。通常是从平板培养物上挑取某一单独菌落或者从一支已长好的斜面菌种，移种至斜面培养基上，接种步骤如下（以从已长好的斜面菌种转接为例）
三、倾注培养法
本法用于饲料中细菌、霉菌的计数。方法是取原始样品或经适当稀释的（通常是10-1~10-5
稀释）液体1mL，置于直径9cm无菌平皿内，倾入已融化并冷至50℃左右的培养基约13~15mL
，立即混匀，待凝固后倒置，于一定温度下培养一定小时，作菌落计数。
四、穿刺接种法
此法多用于双糖、半固体、明胶等培养基的接种，方法与斜面接种类似。用接种针挑取菌落或菌液少许，由培养基表面*直刺至管底（若为三糖铁并在斜面加以涂布），然后沿穿刺线拔出接种针（注：接种半固体看动力者不穿刺到底）。
五、液体接种法
此法多用于单糖发酵试验等，接种方法与斜面接种方法基本相同。以左手持培养基与菌种管，右手持接种环和拔持棉塞，将挑取的菌落或菌液接种于液体培养基内。
扩展资料：
接种细菌应用接种针（环）来沾取细菌标本，进行接种。接种环与接种针为用白金丝或 合金丝所制，亦可用电炉丝代替，因它能耐高热且散热快，便于接种前后通过火焰灭菌（整个接种环烧红即达到灭菌目的）。
在使用接种环时一般用右手持笔式较为方便，左手可持培养基进行配合，其接种程序可分为：灭菌接种环→稍冷→沾取细菌样品→进行接种（包括：启盖或塞、接种划线、加盖或塞）→进行接种环灭菌等五个程序。不同培养基，接种方法也不同。
参考资料：搜狗百科—接种
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时间：2022-06-22 21:08
接种的方法有很多，按培养基种类可分为利用固体培养基和利用液体培养基，以及居中的半固体培养基。
固体培养分离，有涂布平板法，倒平板法，平板划线法，稀释摇管法等。大部分细菌和真菌用固体培养法即可以得到较满意的分离结果了。
液体培养基常用稀释法，比较繁琐，一般需要重复进行几次。
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时间：2022-06-22 23:32
固体培养分离,有涂布平板法,倒平板法,平板划线法,稀释摇管法等。
1，固体培养分离
在一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基。在液体培养基中加入2%左右的琼脂，加热至100℃溶解，40℃下冷却并凝固，使其成为固体状态即为固体培养基。此培养基可供分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏等用。
2，涂布平板法
由于将含菌材料现加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平台法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。
3，稀释倒平板法
又称：浇注平板法。先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如
1
∶
10
、
1
∶
100
、
1
∶
1000
、
1
∶
10000
…），然后分别取不同稀释液少许，与已溶化并冷却至
45
℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出出菌落。
4，平板划线分离法
把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。
5，稀释摇管法
先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右，然后将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释，试管迅速摇动均匀，冷凝后，在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。培养后，菌落形成在琼脂柱的中间。
参考资料：搜狗百科-培养基
