酶分子修饰的方法

发布网友发布时间：2022-07-27 00:58

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热心网友时间：2023-10-23 20:27

1、金属离子置换修饰：定义：通过改变酶分子中所含的金属离子，使酶的特性和功能发生改变的方法。常用于酶分子修饰的是二价金属离子，如：Ca2+，Mg2+，Mn2+，Zn2+，Co2+，Cu2+，Fe2+等。
2、大分子结合修饰：定义：利用水溶性大分子与酶结合，使酶的空间结构发生精细改变，从而改变酶的特性与功能的方法。常用修饰剂：右旋糖酐、聚乙二醇、肝素、蔗糖聚合物、聚氨基酸等。使用前一般需经过活化，然后在一定条件下与酶分子共价结合。
3、酶侧链水解修饰(肽链有限水解修饰)：定义：有些酶的肽链经有限水解，使酶的空间结构发生某些精细改变，从而改变酶的特性和功能的方法。酶蛋白主链修饰主要是靠酶切/酶原激活法。方法有：（1)加常用修饰剂：专一性较强的蛋白酶或肽酶；（2）其他：如EDTA+纯水或稀盐酸透析处理枯草杆菌中性蛋白酶，可使其部分水解。
4、酶分子的侧链基团修饰：定义：采用一定的方法（化学法）使酶蛋白的侧链基团发生改变，从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法。组成蛋白质的氨基酸残基上的功能团，侧链基团改变引起酶蛋白空间构象的改变，从而改变酶的特性和功能。常见被修饰的基团有：羧基、氨基、巯基、咪唑基、酚羟基、胍基、色氨酸吲哚基
修饰剂的要求
一般情况下，要求修饰剂具有较大分子量、有良好的水溶性和生物相容性，修饰后酶的半衰期长。
酶性质的了解
应熟悉酶的分子结构，活性部位，侧链集团。反应活性温度、PH等。
反应条件的选择
反应要在酶稳定的环境下进行，避免破坏酶的活性集团。控制酶分子与修饰剂的分子比例，反应温度，时长。确保酶的高结合率和高回收率。