任何基因表达载体的构建都是一样的,没有差别.对吗?原因是什么,高中知识解答,谢谢
发布网友
发布时间:2022-07-26 23:09
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热心网友
时间:2023-10-23 06:47
不全对。目的基因,启动子,终止子,标记基因,酶等有可能不同。步骤相似。
基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。
将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体,
首先要用一定的*酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。然后用同
一种*酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端(部分*性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果)。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处,首先碱基互补配对结合,两个黏性末端吻合在一起,碱基之间形成氢键,再加入适量DNA连接酶,催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键,从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来,形成一个重组DNA分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合,形成重组DNA分子(也叫重组质粒)的。