丙二醛用TBA检测为什么要测600nm的值
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发布时间:2022-06-02 18:34
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时间:2024-01-12 14:39
600nm一般用于排除非特异性吸收,如样本自身的浊度或者颜色所导致吸光值上升,最终要减去
丙二醛在酸性和高温条件,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑2,4-二酮),在532nm处有最大光吸收,在600nm处有最小光吸收,该复合物的吸光系数为155[mmol/( L.cm )] ,可按公式:A532-A600=155000×C×L算出MDA浓度C(μmol/L),进一步算出单位重量鲜组织中 MDA 含量(μmol/g)。式中,A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值。L为比色杯厚度(cm )。
需要指出的是,植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。为消除这种干扰,经试验,可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。
C(μmol/L)=6.45(A532-A600)-0.56A450
式中: A450、A532和A600分别表示450nm、532nm 和600nm处的吸光度值。算出植物样品提取液中MDA的浓度后,可进一步算出其在植物组织中的含量。