为什么提取质粒时加入异丙醇出现了白色絮状沉淀?
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发布时间：2022-06-03 23:47
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热心网友
时间：2023-10-25 15:33
异丙醇与蛋白质反应，使其沉淀。
1、采用强碱液、加热或溶菌酶（主要针对革兰氏阳性细菌）可以破坏菌体细胞壁，十二烷基磺酸钠（SDS）和TritonX-100（一般很少使用）可使细胞膜裂解。经溶菌酶和SDS或Triton X-100处理后，细菌染色体DNA会缠绕附着在细胞碎片上，同时由于细菌染色体DNA比质粒大得多，易受机械力和核酸酶等的作用而被切断成不同大小的线性片段。
2、当用强热或酸、碱处理时，细菌的线性染色体DNA变性，而共价闭合环状DNA的两条链不会相互分开，当外界条件恢复正常时，线状染色体DN*段难以复性，而是与变性的蛋白质和细胞碎片缠绕在一起，而质粒DNA双链又恢复原状，重新形成天然的超螺旋分子，并以溶解状态存在于液相中。在细菌细胞内，共价闭环质粒以超螺旋形式存在。
3、异丙醇为无色透明液体，有似乙醇和丙酮混合物的气味，能与醇、醚、氯仿和水混溶，能溶解生物碱、橡胶、虫胶、松香、合成树脂等多种有机物和某些无机物，与水形成共沸物，不溶于盐溶液。常温下可引火燃烧，其蒸汽与空气混合易形成爆炸混合物。
扩展资料：
1、异丙醇作为有机原料和溶剂有着广泛用途。作为化工原料，可生产丙酮、过氧化氢、甲基异丁基酮、二异丁基酮、异丙胺、异丙醚、异丙基氯化物，以及脂肪酸异丙酯和氯代脂肪酸异丙酯等。在精细化工方面，可用于生产*异丙酯，黄原酸异丙酯、亚磷酸三异丙酯、异丙醇铝以及医药和农药等，也可用于生产二异丙酮、醋酸异丙酯和麝香草酚以及汽油添加剂。
2、性状：无色透明具有乙醇气味的易燃性液体。沸点（atm,℃,101.3kPa）：82.45。熔点（atm,℃）：-87.9。相对密度（g/mL,20C,atm）：0.7863。相对蒸汽密度（g/mL,空气=1）：2.1。黏度（mPa·s,atm;C）：2.431。闪点（atm;℃）：12。
参考资料来源：百度百科-异丙醇
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时间：2023-10-25 15:33
其次：是用什么方法提取质粒包括原理，
再次：知道为什么要加入异丙醇，起的作用是什么？
最后：才可能知道白色絮状沉淀是什么。
加异丙醇是用来沉淀质粒的，出现白色絮状沉淀，说明质粒提取纯度不够，也就是有蛋白质等污染，蛋白质等杂质和质粒一起沉淀了，能看到，说明污染已经特别严重了，
呵呵 ，可以用酚氯仿或者酒精沉淀再除杂一次，
也可能是你得方法不好，
或者换个方法试试，
也可能是你操作的问题 比如 样品用量大 超过了该方法的提取极限 等
分析清楚后 再做 祝你好运
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时间：2023-10-25 15:34
采用强碱液、加热或溶菌酶（主要针对革兰氏阳性细菌）可以破坏菌体细胞壁，十二烷基磺酸钠（SDS）和TritonX-100（一般很少使用）可使细胞膜裂解。经溶菌酶和SDS或Triton X-100处理后，细菌染色体DNA会缠绕附着在细胞碎片上，同时由于细菌染色体DNA比质粒大得多，易受机械力和核酸酶等的作用而被切断成不同大小的线性片段。当用强热或酸、碱处理时，细菌的线性染色体DNA变性，而共价闭合环状DNA(Covalently closed circularDNA，简称cccDNA）的两条链不会相互分开，当外界条件恢复正常时，线状染色体DN*段难以复性，而是与变性的蛋白质和细胞碎片缠绕在一起，而质粒DNA双链又恢复原状，重新形成天然的超螺旋分子，并以溶解状态存在于液相中。在细菌细胞内，共价闭环质粒以超螺旋形式存在。
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时间：2023-10-25 15:34
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时间：2023-10-25 15:35
