丙二醛乙醛加合物可以被mda检出么

发布网友发布时间：2022-10-16 00:54

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热心网友时间：2023-10-14 03:31

植物组织丙二醛(MDA)酸性条件加热与硫代巴比妥酸(TBA)产显色反应,反应产物粉红色3,5,5三甲基恶唑2,4二酮(Trimet—nine).该物质539nm波吸收峰.由于硫代巴比妥酸与其物质反应,并该波处吸收,消除硫代巴比妥酸与其物质反应影响,丙二醛含量测定,同测定600nm吸光度,利用539nm与600nm吸光度差值计算丙二醛含量.植物组织丙二醛含量测定植物叶片衰程发系列理化变化,核酸蛋白质含量降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等.些指标定程度反映衰程变化.近量研究表明,植物逆境胁迫或衰程,细胞内性氧代谢平衡破坏利于性氧积累.性氧积累危害引发或加剧膜脂氧化作用,造细胞膜系统损伤,严重导致植物细胞死亡.性氧包括含氧自由基.自由基具未配价电原或原团.物体内产性氧主要超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等.植物性氧产酶促非酶促两类防御系统,超氧化物歧化酶(SOD)、氧化氢酶(CAT)、氧化物酶POD抗坏血酸氧化物酶(ASA—POD)等酶促防御系统重要保护酶,抗坏血酸(ASA)原型谷胱甘肽(GSH)等非酶促防御系统重要抗氧化剂.丙二醛(MDA)细胞膜脂氧化作用产物,产能加剧膜损伤.,丙二醛产数量少能够代表膜脂氧化程度,间接反映植物组织抗氧化能力强弱.所植物衰理抗性理研究,丙二醛含量用指标.[材料、仪器、药品]1．材料：植物抗逆性鉴定实验四种菠菜品,即绿色*叶片高温处理室温照.2．仪器：(1)光光度计；(2)离机；（3）水浴锅：(4)平；(5)研钵；(6)剪刀；(7)5ml刻度离管；(9)刻度试管(10ml)；(10)镊；(11)移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱.3．药品：(1)0.05mol/LpH7.8磷酸钠缓冲液；(2)石英砂；(3)5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸,先用少量蒸馏水溶解,定容100ml；(4)0.5％硫代巴比妥酸溶液：称取0.5g硫代巴比妥酸,用5％三氯乙酸溶解,定容至100ml,即0.5％硫代巴比妥酸5％三氯乙酸溶液.[]1．丙二醛提取：取0.5g品,加入2ml预冷0.05mol/LpH7.8磷酸缓冲液,加入少量石英砂,经冰浴研钵内研磨匀浆,转移5ml刻度离试管,研钵用缓冲液洗净,清洗移入离管,用缓冲液定容至5ml.4500转/min离10min.清液即丙二醛提取液.2．丙二醛含量测定：吸取2ml提取液于刻度试管,加入0.5％硫代巴比妥酸5%三氯乙酸溶液3ml,于沸水浴加热10min,迅速冷却.于4500转/min离10min.取清液于532、600nm波,蒸馏水空白调透光率100%,测定吸光度.3．结计算：(A532—A600)×V1×V1.55×10-1×W×V2丙二醛含量（nmol/g）=式：A吸光度；V1反应液总量(5m1)；V提取液总量(5ml)；V2反应液提取液数量(2ml)；W植物品重量(0.5g)；1.55×10-1丙二醛微摩尔吸光系数（1升溶液含1μmol丙二醛吸光度）.4．注意事项：(1)0.0.5％三氯乙酸MDA—TBA反应较合适,若高于浓度,其反应液非专性吸收偏高；(2)MDA—TBA显色反应加热间,控制沸水浴10~15min间.间太短或太均引起532nm光吸收值降；(3)用MDA作植物衰指标,首先应检验测试材料提取液否能与TBA反应形532nm处吸收峰.否则测定532、600nm两处A值,计算结与实际情况符,测高A值假象；(4)糖类物质干扰条件(深度衰),吸光度增,再由于脂质氧化产物MDA含量升高,水溶性碳水化合物增加,由改变提取液,能再用532nm、600nm两处A值计算MDA含量,测定510、532、560nm处A值,用A532(A510—A560)/2值代表丙二醛与TBA反应液吸光值.