发布网友 发布时间:2022-10-12 11:26
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热心网友 时间:2023-10-21 18:38
一、启动子
常见组成型启动子如下:
二、标签
标签,通常是相对较小的氨基酸序列。如果您研究的是未鉴定的蛋白质,或者尚未开发出优质抗体的蛋白质(仅仅因为您研究的蛋白质具有可商购的抗体,那并不意味着它是优质的),那么您的第一步就是检测,免疫沉淀或将亲和标签融合到蛋白质上纯化蛋白质。
标签选择建议:
1. 如果是编码基因,可以考虑增加一个标签,有利于后续的检测;
2. 有些标签多串联几个,比如3FLAG,3HA等,可以增加检测的灵敏度;
3. 标签的位置,理论上标签可以放在目的基因的5端和3端,通常默认放在基因的3端,但是具体需要根据目的基因的功能考虑,比如目的基因是否有信号胎,目的基因的C端后期是否会被切除等,这些因素都会决定标签的位置;
4. 有些标签较大,举例GST标签,可以考虑增加蛋白酶比如Thrombin,增加到GST与目的基因之间,后期可以很方便的将GST标签切除。
常见标签及功能应用如下:
自【吉凯基因】