蛋白质的提取

发布网友发布时间：2022-04-22 09:39

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热心网友时间：2023-10-08 16:59

PBS是磷酸缓冲液。为了防止PH值过于剧烈的变化而造成蛋白质变性。

一般蛋白质在水性溶液中就能溶解。不知你做的是什么蛋白?如果是变性蛋白则可能不溶。不同PH的PBS是应为在不同的提取步骤中的最适pH是不同的。

我说的水溶性蛋白是指一般的蛋白质。人体皮肤表面是角蛋白，这类蛋白不溶于水。

我强烈怀疑你没有学过基础的生物学化学原理。

热心网友时间：2023-10-08 16:59

稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面，多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间。但另一方面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温（5度以下）操作。为了避免蛋白质提以过程中的降解，可加入蛋白水解酶抑制剂（如二异丙基氟磷酸，碘乙酸等）。
下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。
1、pH值
蛋白质，酶是具有等电点的两性电解质，提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH 范围内。用稀酸或稀碱提取时，应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化，从而导致蛋白质构象的不可逆变化，一般来说，碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取，而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。
2、盐浓度
稀浓度可促进蛋白质的溶，称为盐溶作用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合，具有保护蛋白质不易变性的优点，因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐，一般以0.15摩尔。升浓度为宜。缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。

二、有机溶剂提取法

一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶，不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中，可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂，它们具的一定的亲水性，还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必须在低温下操作。丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别优越，一是因为丁醇亲脂性强，特别是溶解磷脂的能力强；二是丁醇兼具亲水性，在溶解度范围内（度为10%，40度为6.6%）不会引起酶的变性失活。另外，丁醇提取法的pH及温度选择范围较广，也适用于动植物及微生物材料。

参考资料：http://hi.baidu.com

热心网友时间：2023-10-08 17:00

善于观察生活的同学会发现，当头发或指甲不小心碰到火源的时候，便会散发出一股如同烧鸡毛的气味，好奇的同学可能会寻根究底，原来这种气味是蛋白质燃烧产生的。
指甲，头发，鸡毛以及动物的蹄爪成分都是蛋白质，它们来源于外胚层细胞，包括了皮肤及皮肤的衍生物学上称之为角蛋白。它是一种不溶于水的纤维状蛋白质，有αˉ角蛋白和βˉ角蛋白两类，这两类蛋白质只是构象不同，它们之间可以相互转化，在湿热条件下，αˉ角蛋白自变成βˉ角蛋白，冷却干燥时，α螺旋被撑开，各圈间的氢键被破坏，变性成β构象。这也是现在卷发行业的理论基础，理发师使用还原剂氧化剂破坏蛋白质多肽键间氢键，可将卷发变直，直发变卷。根据含硫量大小，αˉ角蛋白可分为硬角蛋白和软角蛋白两类。爪，角，甲，中的角蛋白是高硫角蛋白，质地硬，不能拉伸；皮肤及毛发的角蛋白为低硫软角蛋白，它的伸缩性比硬角蛋白好。
头发中含有丰富的各种蛋白质，它使头发乌黑，亮泽，富有弹性，目前有商家从黑米中提取一种黑米蛋白，但头发能否有效吸收这种蛋白还是未知，所以我们是否能从我们自身的头发上提取这类能促进头发生长良好的营养物质，把它做成口服的药液，供人服用，更有利于人体吸收。
二、实施过程及方法
第一步溶解
因为构成头发的主要成分αˉ角蛋白不溶于水，但它溶于酸，之后用碱中和；
第二步粗分级分离
将所要的蛋白质与其它杂蛋白分离开来（可用盐析，等电点沉淀法）；
第三步细分级分离
用层析法凝胶过滤，吸附层析以及亲和层析等方法进一步纯化；
第四步结晶
将纯化的蛋白质结晶，然后重结晶；
第五步后处理
把结晶的蛋白质溶于一种溶质中，使蛋白质溶解，便于人吸收。
三、总结与收获
日常生活中，我们经常理发，而剪掉的头发就是一种价值很大的资源，甚至它所含有某些蛋白质在自然界动植物中含量极少，如果经过合理利用与开发，就能生产出成本低廉但保健价值极大的营养品。