如何从血液中提取游离DNA

发布网友发布时间：2022-04-22 09:39

共2个回答

热心网友时间：2023-08-31 13:18

高中生物里边用的方法
原理：
1. DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。

3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

准备工作：

制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g／mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500 mL烧怀中，注入新鲜的鸡血（约180 mL），用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。（也可以用离心机离心2 min（转速1000转/分）。用吸管吸去上清液。

方法步骤：
1．提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min
2．溶解DNA：
3．析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢
4．过滤：取黏稠物
5．再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。3 min
6．过滤：取滤液。
7．提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5 min
8．DNA的鉴定：沸水浴5min

要是其他用途你就在看看七他人的回答好了。

热心网友时间：2023-08-31 13:18

游离DNA也叫cell free DNA，一般存在于血浆、血清、胸腹水、脑脊液等样本中，含量较少，较难提取，游离DNA提取检测用Qiagen、BIOG方法一般比较普遍，基本上满足了肿瘤基因检测的需要。