发布网友 发布时间:2022-06-14 02:43
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热心网友 时间:2023-10-16 17:44
病毒名称:悬钩子丛矮病毒Raspberrybushydwarfvirus(RBDV)。
分类地位:悬钩子病毒属Idaeovirus。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.034.0.01.033。
病毒异名:罗甘莓退化病毒Loganberrydegenerationvirus。
病毒提纯:按Barnett&Murant(1970)提纯方法的改良步骤(A.F.Murant,未发表):接种昆诺藜后约10d,采收系统病叶,每100g加400ml0.05mol/L(pH7.0)磷酸钠缓冲液,内含0.02mol/L2-巯基乙醇,匀浆,用0.5mol/L柠檬酸调至pH4.8,3000r/min,离心20min。此步所得制剂,有的病毒在上清液中,有的在沉淀中。若病毒在上清液中,则加PEG(分子质量6000u)达8%(W/V)和NaCl至0.8%(W/V),低速离心,得沉淀,用0.05mol/L(pH6.0)柠檬酸钠缓冲液(含0.02mol/L2-巯基乙醇)悬浮(以后各步的沉淀都如此处理)。假使病毒在沉淀中,则沉淀置pH4.8柠檬酸缓冲液(含2-巯基乙醇)中提取过夜,病毒可从沉淀中提出,低速离心,除去不溶物,然后同上PEG沉淀。经2或多次差速离心,最后并经蔗糖密度梯度离心进一步纯化。提纯得率为每100g病叶可多达5mg病毒,但通常仅0.5~1mg。
病毒理化特性:
①病毒粒子。球状,直径33nm,沉降系数115S。A260/A280=1.62。
②核酸。核酸含量24%,单链RNA,三分体基因组,分子质量分别为2.0*106u、0.8*106u、0.3*106u。
③蛋白。分子质量29ku。