发布网友 发布时间:2022-07-04 08:14
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热心网友 时间:2023-11-19 18:11
作用特点包括:
(1) 糜蛋白酶在刚分泌出来时,呈酶原状态(含245个氨基酸的一条肽链),受长中胰蛋白酶的致活作用,在肽链Leu13-Ser14间及Arg15-Ile16间切下二肽(Arg15- Ser14)同时在Tyr146-Thy147及Asn148-Ala149间又切下一二肽(Thr147-Asn148),使肽链折断成三条链,但仍由二硫键维系成一体,并折叠盘曲成有活性的酶。糜蛋白酶的内部构成一容纳作用物的疏水口袋,深度为10-12 Å,截面为3.5-4和5.5-6.5 Å,正好容纳作用物的芳香族环(6×3.5 Å)或亮氨酸等疏水性氨基酸的侧链(4 Å)。在口袋的底部有 Ser189可与疏水性氨基酸相互作用。另有一氧口袋可容纳受攻击的肽链的羰基,并为Ser195及Gly193的正性NH-所吸引,使羰基C呈正电性。这样使Ser195中的负电性氧可对所作用的肽键的羰基C,进行亲核攻击。
(2) 酶分子还与作用物分子有广泛的结合,使释出大量的△H,以推动反应进行。如与酶分子的Ser214等形成氢键,还可形成盐键等。以作用物中受攻击的疏水性氨基酸侧连而言,其疏水性程度越大,则其Kcat/Km越大,表明越易与疏水口袋相结合,越易起反应。
(3) 由于酶分子肽链的折叠盘绕,将Ser195,His57及Asp102三个参与催化的基团相互靠近构成一电子传递的电荷中继系统(charge-relay system),糜蛋白酶中电子传递中继系统的形成使Ser195的H+被His57,进而被Asp102所吸引,使Ser195的O趋于活泼的负电性,有利于它对肽键羰基C的亲核攻击。
(4)Ser195的O向肽键的羰基C作亲核攻击时,先形成一不稳定的四面体过渡态。随之,受攻击的肽键的NH-接受His57的H,而使N侧肽链脱落下来。溶剂中的水分子H+及OH-乃分别与His57及羰基C结合,而使另一部分肽链脱落下来。完成了水解过程。 综上所述,在糜蛋白酶的催化机制中,也包含了前述四种机制的综合效应,另外可能还有一些至今尚未发现的机制在起作用,使酶具有高效催化的特殊功能。
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热心网友 时间:2023-11-19 18:12
通过糜蛋白酶的催化作用机制阐述哪些催化协同作用体现出其多功能催化作用