PDA培养基中沉淀物很多，怎么处理，真菌生长一半，看试管后面发黑。

发布网友发布时间：2022-07-01 20:38

共3个回答

热心网友时间：2023-10-22 01:49

呵呵,PDA培养基沉淀的问题已经困扰大家很多年的.

原因:
做个显微镜检就很容易发现,PDA培养基沉淀物来自马铃薯和琼脂的植物细胞.

解决方案:
马铃薯煮汁经过速冻结冰后再解冻时,汤汁中的薯细胞会聚成棉絮状沉淀.经过滤即可得基本无沉淀的澄清薯汁.

具体流程:
按常规将马铃薯细切成黄豆粒大,计量加水煮沸20分钟,用一层粗纱布或网纱过滤,待60℃左右时装在清洁的废矿泉水塑胶瓶内盖紧,冷却后置冰箱冷冻室内一昼夜。用时取出在室温中或用自来水冲浸解冻,不可加热）,即可见到凝聚沉淀,然后用密细布或滤纸过滤,过滤时不可用力摇震以免分散沉淀影响效果,滤汁补足.

这是97年《食用菌》上一篇paper介绍的方法，很好用。

发黑:
碳源和氮源混匀后再高温灭菌,某些情况下,羟基和氨基会发生缩合反应,使培养基黑化.
解决方法:
碳源氮源分开灭菌,再无菌混合.

补充:,糖在高温下是会焦化的,如果碳源单独灭菌,仍然会发黑,那就请注意下温度是不是太高了,时间是不是太长了,以及葡萄糖的浓度是不是太高了,一般2%就可以了.

我做的时候是115度,10分钟.

热心网友时间：2023-10-22 01:49

你说的问题实际是常有的，但是如果你多过滤两次。沉淀就很少了。至于接种后斜面背面发黑，如果集中在接种点周围。其实就是接种点萌发生长后产生的阴影。与几分钟没关系。

热心网友时间：2023-10-22 01:50

土豆煮后你可能用纱布过滤的太狠了，把一部分土豆渣挤入到培养基里面，所以有很多的沉淀。另外可能是不是琼脂的质量或是没有溶解完全？

关于发黑，不知道是不是所有的菌种都发黑？见过这样的情况，我们没有太多的注意，有人说是培养条件不一样产生了色素之类的。

我们实验室现在做实验都用CYM（完全培养基），一般的实验用，长势差不多，但你是做菌种用的，小心试验一下，呵呵！