如何选用琼脂糖凝胶电泳时的marker
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发布时间:2022-04-23 00:29
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热心网友
时间:2023-10-09 08:06
如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.
另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比较合适.
如果分子量很大,例如在几k,就可能会选择向lamda HindIII这样最大到23K的marker.否则凝胶浓度不合适,marker条带分不开,影响对你目标分子分子量的判断.
热心网友
时间:2023-10-09 08:07
琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳糖和1,4连结的3,6-内醚-L-半乳糖交替连接起来的长链 。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。
琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。质量较好的琼脂糖强度通常在1200克/cm2以上(1%胶浓度)。
琼脂糖的凝胶性是由存在的氢键所致,凡是能破坏氢键的因素都能导致凝胶性的破坏。琼脂糖具有亲水性,并几乎完全不存在带电基团,对敏感的生物大分子极少引起变性和吸附,是理想的惰性载体。在琼脂糖制备过程中需要把琼脂果胶尽量去除,否则琼脂糖有可能存在极微量硫酸根和丙酮酸取代电离基团,就会造成电内渗(EEO),电内渗对质点的移动产生影响。
如何选用琼脂糖凝胶电泳时的marker
如果是核酸marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量最大到1000,或者500的mark...
pcr产物纯化试剂盒原理
北京索莱宝科技有限公司(Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd.)是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。总部位于北京,并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌...
琼脂糖凝胶电泳时如何使marker更清晰?
胶浓度适当的高一点,电泳时的电压低一点。这样跑出来的条带会好看一些。一般marker都有推荐浓度范围,取最高的那个浓度。电压象80V或者60V。这样会好一些。这个不象跑电一条带,有时候弄到200V都行。另外,染料象EB之类的,加得适当,不要太多,也别太少。太多了整个胶都红,太少了,marker后面有...
琼脂糖凝胶电泳的原理是什么?
做琼脂糖凝胶电泳的注意事项:1、Marker的选择 Marker的选择要适中,Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的,这样对目标片段大小的估计才比较准确。如果marker太大就可能跑不开,挤到一起,起不到marker的作用。2、煮胶要完全,胶要摇匀 注意煮胶完全,不然有小颗粒会影响跑胶结果。如果胶没有摇...
PCR,将引物原液做琼脂糖凝胶电泳,一般点样用多大量
1%的就可以,marker要有小的 否则容易跑出胶
琼脂糖凝胶电泳检测dna怎么加marker
ladder Marker,还是DNA染色用的EB或gelgreen。如果是前者的话,那么在点样时加到点样孔里就可以了;如果是后者的话,那么在制胶时加也可以,在最后染色也可以。对EB来说,制胶时加要等琼脂糖溶解以后,稍冷却再加;最后染色就不必多说了。对gelgreen来说,好像只有制胶时加一种方式,方法同上。
凝胶电泳中的marker是指什么?
琼脂糖凝胶电泳marker的作用是分子标记。DNA分子标记具有的优越性有:大多数分子标记为共显性,对隐性性状的选择十分便利;基因组变异极其丰富,分子标记的数量几乎是无限的;在生物发育的不同阶段,不同组织的DNA都可用于标记分析;分子标记揭示来自DNA的变异;表现为中性,不影响目标性状的表达,与不良性状...
琼脂糖凝胶电泳marker的作用
你好,琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用。marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段长度。这是我个人的理解,不知道描述清楚了没。 本回答由网友推荐 举报| 评论(2) 22 0 786817306 采纳率:48% 擅长...
关于琼脂糖凝胶电泳图片分析
“ 2、 琼脂糖浓度 一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb 的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA片段大小间于两者...
如何选择琼脂糖凝胶的浓度? 已解决
目的产物大小80BP的片段,你可以用2.0%的琼脂糖凝胶进行电泳,琼脂糖以及TAE的量的多少,首先与你跑得样品的个数有关,因为你样品的个数决定了你胶槽的体积,胶槽的体积决定了你的TAE的量,决定了琼脂糖的量,比如说你胶槽的体积是20ml, 那么你要配2.0%的胶,就需要20ml的TAE和0.4g的琼脂糖...
琼脂糖凝胶电泳求助marker跑不好是什么问题
1. 胶要摇匀,建议你做大体积的胶;溶胶时每30s固定摇一次,一次20s;沸腾四次,每次5s,然后取出使用手腕力量摇匀,每次摇30s;趁热倒胶;2. 电压不要太低或者太高;自行斟酌;3. 加样要均匀且缓慢;