培养基的配制是怎么样的?
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发布时间：2022-04-23 16:28
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时间：2023-05-07 03:36
1.培养基种类及成分
培养基根据其物理性状大致分成两类，即固体和液体培养基。在培养基中加入一定量的凝固剂（如琼脂、明胶等）即为固体培养基，而不加入凝固剂的即为液体培养基，具体运用上应视培养目的要求不同分别选择采用。
无论是固体还是液体培养基，其基本成分是类似的，一般可大致分为两个部分，即基本培养基如MS、B5、N6、Nitsh等和附加成分，如激素和天然附加物等，其基本成分如表1、表2。
表1 几种培养基主要成分表
表2 几种培养基附加成分表
2.培养基的配制
（1）母液的配制与保存 由于培养不同植物，需要配制不同的培养基。为了减少工作量，可先把药品配成母液（即浓缩液），一般扩大10～100倍，其中大量元素倍数略低，一般为10～20倍，微量元素和有机成分及铁盐等可扩大50～100倍。母液的配制及保存应注意以下几个方面：①药品称量应精确，尤其微量元素化合物应精确至0.0001克，大量元素化合物可精确至0.01克。②配制母液的浓度适当，倍数不宜过大，一是长时间保存后易沉淀，二是浓度大，用量就少，在配制培养基时易影响精确度。③母液贮藏也不宜过长，一般几个月左右，在配好的母液容器上应注明配制日期，以便定期检查，如出现浑浊、沉淀及霉菌等现象，就不能使用。④母液应在2～4℃的冰箱内保存。
（2）培养基的配制 首先要根据培养基配方，算好母液吸取量，并按顺序吸取，然后加入蔗糖溶液，并加入蒸馏水定容至所需体积，并用0.1～1摩尔/升的盐酸或氢氧化钠调整pH，加入琼脂加热溶化，配制好的培养基要趁热分注，倒入试管、三角瓶等培养器皿中，一般至容器1/4～1/5左右，最后加塞或封口准备消毒。
（3）培养基的消毒 由于培养基内有丰富营养物质，极利于细菌和真菌繁殖，造成污染，影响组培的成功，因此培养基消毒是必不可少的一个环节。一般采用高温高压消毒和过滤消毒两种方法。
高温高压消毒：一般用消毒锅消毒，把装有培养基的培养器皿先放入消毒篓中，再放入加有水的消毒锅内，注意容器不能装得过满，以免影响锅内蒸汽循环。装好后将锅盖拧紧，加热，并打开放气阀，待水煮沸后，放气3～5分钟排出锅内冷空气，即可关上放气阀并继续加热，使锅内保持108千帕压力、温度120℃左右，大约15～20分钟即可。
过滤消毒：一些易受高温破坏的培养基成分如引哚乙酸（IAA）、引哚丁酸（IBA）、玉米素（ZT）等，不宜用高温高压法消毒，则可用过滤消毒后加入至高温高压消毒的培养基中，过滤消毒可用细菌过滤消毒器，通过其中的0.45微米孔径的滤膜将直径较大的细菌等滤去，过滤消毒应在无菌室或超净工作台上进行，以避免污染培养基。
