请教:小鼠单个核细胞分离及Ficoll

发布网友发布时间：2023-03-25 13:09

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热心网友时间：2023-10-19 06:06

单核细胞（monocytes）是体积最大的白细胞.其细胞核常偏位,呈多形性,如卵圆形、肾形、马蹄形、不规则形等,常有折叠感；染色质呈疏松网状,着色较浅.胞质较多,嗜碱性,但因含大量细小的嗜天青颗粒而染成灰蓝色,颗粒含过氧化物酶.血涂片,Giemsa染色 .
单个核细胞是指只有一个细胞核的细胞.一般医学检验书上说的是“外周血中单个核的白细胞”包括“淋巴细胞和单核细胞”.外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear
cell,PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞.体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞,目前主要的分离方法是
Ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离.红细胞和
粒细胞密度大于分层液,同时因红细胞遇到Ficoll而凝集成串钱状而沉积于管底.血小板则因密度小而悬浮于血浆中,唯有与分层液密度相当的单个核细胞密
集在血浆层和分层液的界面中,呈白膜状,吸取该层细胞递经洗涤高心重悬.本法分离单个核细胞纯度可达95%,淋巴细胞约占90%～95%,细胞获得率可达
80%以上,其高低与室温有关,超过25℃时会影响细胞获得率.