多克隆抗体的纯化方法都有哪些?急需高手讲解
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发布时间：2022-04-29 19:49
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热心网友
时间：2022-06-22 02:32
或蛋白G
微球纯化法作为最常用的方法。这种方法效率高，能为常用的实验方法提供足够纯化的抗体，而且随着商品化的蛋白A，和蛋白G
基质的出现，能将任何来源的抗体纯化。抗体的纯化也可采用传统的色谱法，在某些情况下非常有用。这些方法包括DEAE
离子交换色谱法、硫酸镀沉淀法及其他方法。但是用蛋白G
或蛋白A
亲和柱法纯化较其他方法简单，并且纯化效果是其他方法的数倍。因此在所有方法中，我推荐这种方法。
有一种情况不适于应用蛋白G
或蛋白A
亲和柱纯化抗体，即多克隆抗体需要进一步分离，且针对某种特异性抗原的组分需要分离。此时可用抗原结合的亲和柱纯化抗原恃异性抗体。
原理就是抗原抗体的结合。蛋白A和G被锚定在树脂上，IgA和IgG在过树脂柱子的时候能够被protein
A和protein
G捕获，留在柱子上，其他的杂蛋白会被洗掉，最后用特殊的洗脱液能够将IgA和IgG纯化下来。原理跟普通蛋白纯化的原理是一样的，只不过吸附介质不一样而已。
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