如何预防PCR实验室污染？

发布网友发布时间：2022-04-20 04:34

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热心网友时间：2023-08-13 02:10

1.PCR实验室严格分区
整个检测过程应严格分区进行：PCR反应体系的配置区，标本处理、加样区，PCR扩增、荧光检测及结果分析区。各区使用的仪器、设备、耗材和工作服应独立专用。
2.进行PCR操作时，工作人员应该严格遵守SOP操作规程
操作人员应经过专业培训，具有一定经验和操作技能。
3.分装PCR试剂
当使用的 PCR 试剂盒，不是独立分装的反应液时，应将PCR反应液先配置好，然后分装到反应管-20℃保存，以减少重复加样次数，避免污染。PCR试剂、PCR反应液与样品及PCR产物分开保存，试剂盒里面的阳性对照、阳性参考品也应该与试剂分开放置，不应放于同一冰箱。
4.正确使用加样器
吸样时要特别小心，应缓慢匀速，避免液体溅到加样器头上。尽量一次性吸完，忌反复多次抽吸，以免交叉污染或产生气溶胶。打出液体后拇指不应松开按钮，将吸嘴压掉后再将拇指松开，避免液体回吸。
5.做好实验室的清洁消毒
操作台、移液器、离心机、PCR扩增仪等仪器设备应经常用10%次氯酸或 75%酒精、紫外线灯或臭氧消毒处理。特别是实验完成后，应立即清洁工作台，并进行消毒。
6.做好实验防护
使用不含荧光物质的一次性手套、一次性专用离心管、自卸式移液器和带滤嘴吸头。选择质量好的离心管，以避免样本外溢和外来核酸的进入，打开离心管前应先离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部，以防止管内液体溅出，造成污染。反应管中尽量避免气泡存在，管盖应盖紧。试剂准备和标本处理应使用超净工作台或防污染罩，以防止对环境污染。