卧室可以预防pcr的实验污染除外
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发布时间:2022-04-20 04:34
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时间:2023-06-27 15:49
1.pcr。
2.标本间交叉污染、PCR试剂的污染、PCR扩增产物污染、实验室中克隆质粒的污染。
3.标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染。
4.标本核酸模板在提取过程中,由于吸样*污染导致标本间污染。
5.有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。
6.PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样*、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。
7.PCR扩增产物污染:这是PCR反应中最主要最常见的污染问题。
8.因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。
9.最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。
10.在空气和液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样*的反复吸样都可形成气溶胶而污染。
11.据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝,因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。
12.实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见。
13.因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力。
14.其污染可能性也很大。
15.聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DN*段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。
16.因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。
17.这也是微量证据的威力之所在。
18.由1983年美国Mullis第一提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真正诞生。
19.到如今2013年,PCR已发展到第三代技术。
20.1976年,中国科学家钱嘉韵,发现了稳定的TaqDNA聚合酶,为PCR技术发展也做出了基础性贡献。
21.PCR是利用DNA在体外摄氏95°。
22.高温时变性会变成单链,低温(经常是60°。
23.C左右)时引物和单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°。
24.C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5-3)的方向合成互补链。
25.基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。