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RNA提取原理

发布网友 发布时间:2022-04-28 22:27

我来回答

3个回答

热心网友 时间:2022-06-24 03:52

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:

Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。

Trizol作用原理:

在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。

水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。

扩展资料:

抽提RNA的使用目的

RNA用于不同的后续实验,其质量要求不尽相同。

cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留;

Northern对RNA完整性要求较高,对酶反应抑制物残留要求较低;

RT-PCR对RNA完整性要求不太高,但对酶反应抑制物残留要求严格。因此,明确实验目的是进行后续实验的首要条件。

参考资料来源:百度百科-RNA

热心网友 时间:2022-06-24 03:52

蛋白质在有机溶剂中变性所以形成沉淀,中间那白色的是变性的蛋白质。
我们做过提取DNA的实验,用的是饱和酚提取的,后来又用了氯仿的。DNA、RNA很容易被分解,特别是RNA,RNA酶到处都有,我们在做DNA提取时用到EDTA抑制DNA酶的活性,防止被降解。
分层不是看分子的大小的,看它在离心力的作用下运动的快慢,一般密度大的运动的快一些在下面。
下层有机相中有一些脂类

热心网友 时间:2022-06-24 03:52

DNA不是单独存在于细胞中的,是染色体

蛋白质是有机物没错,但是它是复杂的有机物,有亲水基,疏水基,所以不是只要是有机物就溶于有机溶剂的

分层看的是密度,不是分子量的大小
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