发布网友 发布时间:2022-04-28 22:27
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热心网友 时间:2022-06-24 03:52
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:
Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。
Trizol作用原理:
在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。
水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。
扩展资料:
抽提RNA的使用目的
RNA用于不同的后续实验,其质量要求不尽相同。
cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留;
Northern对RNA完整性要求较高,对酶反应抑制物残留要求较低;
RT-PCR对RNA完整性要求不太高,但对酶反应抑制物残留要求严格。因此,明确实验目的是进行后续实验的首要条件。
参考资料来源:百度百科-RNA
热心网友 时间:2022-06-24 03:52
蛋白质在有机溶剂中变性所以形成沉淀,中间那白色的是变性的蛋白质。热心网友 时间:2022-06-24 03:52
DNA不是单独存在于细胞中的,是染色体