沉淀蛋白质的方法有哪些,各有和特点?
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发布时间：2022-05-15 08:59
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热心网友
时间：2023-10-16 17:40
等电点沉淀法和盐析
一、等电点沉淀法
等电点沉淀法是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。
在等电点时，蛋白质分子以两性离子形式存在，其分子净电荷为零(即正负电荷相等)，此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥，分子相互之间的作用力减弱，其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀，所以蛋白质在等电点时，其溶解度最小，最易形成沉淀物。
等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小，从而有利于悬浮液的过滤。
二、盐析
盐析是指在蛋白质水溶液中加入中性盐，随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质，溶解度又大，在蛋白质溶液中，一方面与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐，可以使蛋白质性质发生改变而凝聚，进而从溶液中析出，这种作用叫作变性，性质改变，是化学反应，无法复原。
把动物脂肪或植物油与氢氧化钠按一定比例放在皂化锅内搅拌加热，反应后形成的高级脂肪酸钠、甘油、水形成混合物（胶体）。往锅内加入食盐颗粒，搅拌、静置，使高级脂肪酸钠与甘油、水分离，浮在液面。
扩展资料：
蛋白质的变性
1、物理因素包括：加热、加压、搅拌、振荡、紫外线照射、X射线、超声波等
2、化学因素包括：强酸、强碱、重金属盐、三氯乙酸、乙醇、丙酮等。
3、在热、酸、碱、重金属盐、紫外线等作作用下，蛋白质会发生性质上的改变而凝结起来。这种凝结是不可逆的，不能再使它们恢复成原来的蛋白质．蛋白质的这种变化叫做变性。蛋白质变性之后，紫外吸收，化学活性以及粘度都会上升，变得容易水解，但溶解度会下降。
4、蛋白质变性后，就失去了原有的可溶性，也就失去了它们生理上的作用，因此蛋白质的变性凝固是个不可逆过程。
参考资料来源：百度百科-等电点沉淀法
参考资料来源：百度百科-盐析
热心网友
时间：2023-10-16 17:41
答：（1）盐析法，此方法并未破坏蛋白质天然状态，沉淀出的蛋白质可不变性，所以盐析法是分离制备蛋白质或蛋白类生物制剂的常用方法。
（2）有机溶剂沉淀法，通过破坏蛋白质的水化膜而使蛋白质沉淀，此方法在常温下可使蛋白质变性，低温下可使变性速度减慢。
（3）重金属盐沉淀法，可与蛋白质结合形成不溶于水的蛋白质盐沉淀，引起蛋白质变性。临床用于救重金属盐中毒。
热心网友
时间：2023-10-16 17:41
有机溶剂：利用它们的强亲水性破坏水化膜，由于它们不能中和蛋白质所带电荷，需要在pI附近沉淀蛋白质。低温条件下，变性发生缓慢，可用来制备血浆蛋白质。常温下会变性。
重金属盐：带负电荷的蛋白质与带正电荷的重金属离子结合形成不溶性盐而沉淀。用时，需调节pH，使其大于pI，一般会发生变性。
生物碱试剂与某些酸类：带正电荷的蛋白质可与生物碱试剂（如苦味酸、鞣酸、钨酸）或某些酸（如三氯醋酸、*、过氯酸）的酸根隔阂形成盐而沉淀。一般发生变性。临床用于血液化学分析，常用此法除去血液中的蛋白质。
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我就知道这几个了。。。。作为*
