吸收曲线在分光光度法的作用是什么

发布网友发布时间：2022-05-16 02:08

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吸收曲线在分光光度法的作用是在测定样品时按制定吸收曲线时的方法制备待测样品溶液，测定其吸光度，在此吸收曲线上查出被测物质的浓度，从而计算得出该样品某物质的含量。被测物质的浓度应在吸收曲线范围内；不然，则需调整样品溶液的浓度，使在范围内。
分光光度法
（一）分光光度法的测定原理
光是一种电磁波，按波长排列得到光的波谱。
物质呈现的颜色与光有着密切关系。不同波长的可见光可感知不同的颜色。可见光的波长为400—760nm（纳米）。它们对应的颜色为：
紫外线，无色，＜400
nm（波长）
紫400—450，
蓝450—480，
青480—490，
蓝绿490—500，
绿500—560，
黄绿560—580，
黄580—600，
橙600—650，
红650—760，
红外线，无色，＞760。
两单色光具有互补性而成白光，互补光是：红—青，橙—青蓝，黄—蓝，绿—紫红。
溶液对于光具有选择性吸收的作用。某溶液吸收了一种单色光，该溶液即显该单色光的颜色，其它色光通过。于是有：
光的吸收定律——朗伯-比耳定律：光的吸收与吸收层厚度成正比。其数学表达式是——
lg（I0/I1）=kbc，
式中，lg（I0/I1）——吸光度，简记为A；
K——比例常数，与光波长与物质有关，与光强度和溶液浓度厚度无关；
b——液层厚度：
c——溶液浓度。
分光光度法通过测定某样品一定物质的吸光度从而就测定了其含量，而完成了其测定目的。
（二）分光光度法的种类
分为目视比色法，与仪器（分光光度计）比色法两种。
（三）分光光度法吸收曲线的制定方法
配制4个以上浓度或适当比例的待测而分标准溶液，以空白溶液为参比溶液，在选定的波长下，分别测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线。