乙醇沉淀蛋白质有哪些注意事项
发布网友
发布时间:2022-05-13 07:54
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热心网友
时间:2024-02-21 17:08
这就是五变参数:
蛋白质含量,离子强度,溶液pH值,乙醇浓度,溶液温度。
1。蛋白质含量,愈高,共沉多;反之,分离愈彻底。当然有度。溶液太稀了,成本高。
2。离子强度:这与介电强度有关。
3。怠掸糙赶孬非茬石长将溶液pH值:调到目标蛋白等电点周围。
4。乙醇浓度:一般来说乙醇浓度多少,与目标蛋白的分子量有关:比如8%,可沉淀纤维蛋白原,20%可沉淀球蛋白,40%可沉淀白蛋白等等,当然,乙醇浓度与溶液pH值配合使用。加入乙醇不能过快,防止局部过浓。要边加边摇动。
否则,共沉多!或者局部变性。
5。溶液温度:必须低温,乙醇反应是个放热反应,如果温度高,可引起蛋白质变性,不可逆的变形。
这五变参数,要综合,动态的调整,可达到精确分离蛋白质的作用。
热心网友
时间:2024-02-21 17:09
1
保持低温,防止变性。在冰上做,试剂要预冷。
2
加入乙醇怠掸糙赶孬非茬石长将不能过快,防止局部过浓。要边加边摇动。