如何用明胶包被细胞培养板

发布网友发布时间：2022-05-13 05:21

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热心网友时间：2023-11-21 09:04

这是由细胞的性质特点决定的。有些细胞是必须要附着在支持物上才可以生长的，比如肝细胞，胃上皮细胞等等。而有些细胞可以悬浮生长，比如骨髓细胞白，血病细胞等等。这些细胞的生长都是需要添加血清的，而不是有些人说的，加入血清后会贴壁。
Q1.明胶溶液配置的问题
A1: 用去离子水来配即可。国产的行不行要去试验，保险的就是买进口的。其实通常是买Sigma的gelatin粉末来配就好了，不用买配好现成的。配好的浓缩液可分装放-20度长期保存，即将要用的浓缩液可放4度来备用。
Q2.明胶使用浓度的问题
A2:1%是浓缩母液的浓度，使用前才取适量稀释成0.1%来包被。
Q3.明胶消毒的问题:
A3: Gelatin是用高温高压杀菌的，其他你所说的方法也不是不能用，只是没必要。
Q4.明胶包被培养瓶的问题
A4:通常是包被1小时就够了，然後吸乾，不需要清洗。因为你配gelatin溶液中并没有含其他有害的物质，冲洗只是多了一道没必要的工作。包被完要清洗是Collagen才需要的。
Q5.明胶包被后的培养瓶使用期的问题
A5.这个我不知道，但基本上是越快使用越好。由於包被的过程很快，所以我都是当天包被，在等的过程中可以去做其他的事，包被即将完成的前20分钟就开始处理细胞，等细胞收下来包被也就做好了，马上就用。 0.1%的明胶适合大多数细胞培养时的包被，在四度放置不会出现凝胶状。我参考的文献说内皮细胞用1％的明胶包被，也就是母液，它在四度放置时会适度凝结。我的内皮细胞用1％的明胶包被效果我觉得还不错。不管你用包被1小时的方法还是包被4小时的方法，都最好从包被开始到使用的间隔不超过一天，包被的容器放置时间越长越不好。