1、样品准备：液体样品根据用户提供的技术指标，检查浓度范围是否合适，如果需要稀释，则要考虑所需溶剂类型和稀释倍数。固体样品均匀粉末、片状或具有光滑平面的块状样品，均可直接测定。
2、开机：接通电源，打开主机开关，点燃(打开)光源后，根据说明书要求启动计算机。
3、检测前准备：参照仪器说明书，在20天内至少进行一次激发校准和发射校准，检测前仪器应预热。
4、工作条件的选择：环境温度应在20C5C；相对湿度不大于70%；电源稳定，无磁场、电场干扰。根据样品的特性及荧光强度，选择合适的仪器工作条件(如狭缝、PM增益、响应时间等)。
5、荧光激发光谱测定：设置仪器参数，扫描发射波长，找到max^em，以此为发射波长，记录发射强度作为激发波长的函数，便得到激发光谱。
6、荧光发射光谱测定：设置仪器参数，扫描激发波长，找到maxAex，以此为激发波长，记录发射强度与发射波长间的函数关系，便得到荧光发射光谱。
7、差谱测定：设置仪器参数，选择合适的工作方式，测定背景溶液的发射光谱并储存起来，在一定的工作方式下，扫描样品溶液的发射波长，得到当时的光度值和储存的背景值之间的差示值，即差谱。
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